酶底物法是水质微生物检测领域广泛应用的现代技术,含酶底物程控定量封口机、51 孔 / 97 孔定量检测盘、橡胶托垫、DST 酶底物试剂、无菌取样瓶等全套设备耗材。它适用于总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪大肠菌群的快速定量分析,相比传统培养法,具备操作简便、检测周期短、结果精准的优势,目前成为政府监管、水务、食品饮料等行业的检测方案。
已经列入:
(1)GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法》微生物指标。
(2)NY/T 1665-2008《畜牧用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定-酶底物法》
(3)HJ 1001-2018《中华人民共和国国家环境保护标准-水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定-酶底物法》。

方法优势:
(1)无需在无菌室内操作。
(2)手工操作时间小于1分钟。
(3)无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
(4)24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
固定底物技术酶底物法原理:
酶底物法原理采用总大肠菌群产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-B-D-galactopyranoside)使培养液呈黄色;大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解荧光色源底物MUG(4-methyl-umbeliferyl-β-glucuronide )使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、微大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌,Colitech酶底物法试剂是采用GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检测方法》中固定底物技术(Defined SubstrateTechnology,DST)的Minimal Medium ONPG-MUG (MMO-MUG)和环境标准HJ 1001-2018的培养基。当Colitech酶底物法检测试剂加入含有总大肠菌群细菌组的水样,目标细菌在含有固定底物Minimal Medium ONPG-MUG的培养基中繁殖,大肠菌群细菌组产生的特异性生物酶β-半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的固定色原底物ONPG,使培养基呈现黄色;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性β-葡糖苷酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的固定荧光底物MUG,产生特征性蓝色荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium 0NPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现黄色。因而可以定性检测水中总大肠菌群、耐热(粪)大肠菌群和大肠埃希氏菌。当水样中少数非目标细菌的生物酶试图和ONPG或MUG反应,干扰检测结果时,colitech培养基中特殊配方的基质会抑制其反应进程,控制假性的产生;同时,这些特殊配方基质可以有效促使目标细菌的生物酶和固定底物反应,所以假阴性发生率比传统方法更低。Colitech酶底物法试剂和51或97孔定量检测盘联合使用,可以定量检测100毫升水样中目标细菌,51孔定量检测盘检测范围0-200MPN,97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN,而不需稀释。
酶底物法方法检测:

技术指标:
程控定量封口机技术指标
序号 | 技术名称 | 技术指标 |
1 | 名称 | HKE-ES-02 程控定量封口机 |
2 | 用途 | 用于酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌,粪大肠菌群 |
3 | 可靠性 | 无漏液,无破孔 |
4 | 稳定性 | 可检测40,000个样品以上,使用寿命大于5年 |
5 | 方便性 | 开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口 |
6 | 快捷性 | 无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群 |
7 | 重量 | ≤25kg |
8 | 尺寸 | 39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高 |
9 | 预热时间 | ≤14min |
10 | 噪音 | <50dba |
11 | 外罩温度 | ≤40ºC |
12 | 封口速度 | 51孔、97孔定量检测盘封口时间≤15秒/个 |
13 | 工作电压 | AC 220V±10%,50HZ |
14 | 工作环境温度 | -10ºC-50ºC |
15 | 检测范围 | 配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml (水样不稀释) 配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml (水样不稀释) |
手持式紫外线分析仪带暗室
序号 | 技术指标 | 性能 |
1 | 名称 | 手持式紫外线分析仪 |
2 | 波长 | 双波长(254nm,366nm) |
3 | 工作电压 | AC 220V±10%,50Hz |
耗材
名称 | 单位 | 数量 | 包装 |
酶底物法检测试剂 | 盒 | 1 | 200个/盒 |
100ml定量瓶/取样瓶 | 箱 | 1 | 200个/箱 |
97/51 定量孔板/定量检测盘 | 箱 | 1 | 100个/箱 |